Menţinerea volumului culturii prin accelerarea simultană a dezvoltării de linii celulare
Monitorizaţi tendinţele concentraţiei de celule viabile aproape în timp real, astfel încât deciziile privind clasificarea clonelor şi transferul acestora în medii de cultură noi să poată fi luate mai devreme, fără reactivi suplimentari
De ce dezvoltarea de linii celulare încetineşte în bioprocesare
În dezvoltarea de linii celulare, termenele se prelungesc atunci când informaţiile privind creşterea depăşesc momentul de luarea a deciziilor – în special în timpul analizei unor panouri mari de clone din culturi la scări de ordinul mililitrilor. Analiza prin spectroscopie Raman de linie cu o configuraţie a fluxului la nivel de microvolum transformă tendinţele concentraţiei de celule viabile/viabilităţii într-un semnal operaţional pe care îl puteţi utiliza în timpul analizei pentru detecţia timpurie: clasificaţi mai repede, retestaţi mai rar şi păstraţi volumul culturii, menţinând în acelaşi timp fluxurile de lucru compatibile cu automatizarea viitoare.
Procesul de analiză a clonelor este o problemă de randament deghizată într-o problemă de analiză. Puteţi măsura celulele – dar nu suficient de repede, nu suficient de consistent şi nu fără a consuma culturi preţioase din faza incipientă. Când informaţiile privind concentraţia de celule viabile sosesc târziu, echipele întârzie trierea, repetă testele de confirmare şi prelungesc ciclul de analiză şi transfer al acestora în medii de cultură noi, ceea ce creşte timpul şi costurile la nivelul întregului program.
Tendinţa concentraţiei de celule viabile de care vă puteţi folosi
Spectroscopia Raman permite monitorizarea neinvazivă, online, a tendinţelor concentraţiei celulare şi a semnalelor de viabilitate în mai multe culturi. Cu ajutorul modelelor chemometrice construite pe o gamă largă de concentraţii ale celulelor viabile, echipele pot diferenţia tendinţele relative ale concentraţiei de celule viabile între clonele de celule ovariene de hamster chinezesc – şi pot compara candidaţii cu o dependenţă mai mică de ciclurile de numărare bazate pe reactivi.
Ce devine vizibil prin spectroscopia Raman:
- Separarea din timp a concentraţiilor de celule viabile între clonele candidate (semnal de clasificare)
- Traiectoria de creştere în timpul analizei şi transferurilor în medii de cultură noi (tendinţă, nu o imagine instantanee)
- Semnale comparabile între liniile de celule ovariene de hamster chinezesc/proteinele exprimate (consistenţa analizei)
Această capacitate esenţială a fost demonstrată în studii vizate de experţi, care arată că spectroscopia Raman poate modela în mod fiabil creşterea celulară, concentraţia de celule viabile şi profilurile metabolice în culturile de celule ovariene de hamster chinezesc în diferite condiţii.
Proiectat pentru culturi de ordinul mililitrilor şi randament ridicat
Pentru a se adapta constrângerilor din etapa iniţială, un sistem Raman bazat pe flux este implementat într-o configuraţie de volum mic, care permite obţinerea fiabilă a spectrelor din volume minime de eşantion. Celula de microflux minimizează consumul, menţinând în acelaşi timp calitatea spectrală, iar arhitectura sa permite integrarea viitoare în concepte de manipulare automatizată.
Acest flux de lucru proiectat se aliniază nevoilor de dezvoltare a liniilor celulare:
- Volume mici de eşantion
- Randament ridicat de analiză
- Măsurători reproductibile în multe culturi
- Integrare viitoare în platforme de cultivare automatizate
Clasificare mai rapidă a clonelor cu mai puţine retestări
Când tendinţele concentraţiei de celule viabile sunt disponibile cu o sarcină minimă de eşantionare, deciziile se iau mai devreme. Echipele pot tria mai repede clonele cu performanţe slabe, pot stabiliza deciziile de transfer în medii de cultură noi şi pot converge mai rapid către clone robuste şi productive – fără a aştepta rezultatele lente ale testelor. Rezultatul nu constă în „mai multe date”, ci în o sincronizare mai bună: rezultatele rapide permit luarea deciziilor în timp ce setul de clone este încă amplu şi opţiunile sunt încă deschise.
Câştiguri operaţionale pe care le puteţi măsura în dezvoltarea liniilor celulare
Prin reducerea dependenţei de ciclurile de numărare care implică multe consumabile, echipele de dezvoltare de linii celulare pot documenta:
- Cicluri de analiză mai scurte şi o selecţie mai rapidă
- Utilizare redusă de reactivi/consumabile
- Volum mai mic de cultură consumat în faza iniţială de dezvoltare
- O comparabilitate mai consistentă între seturi mari de clone
- Analize care se îndreaptă spre automatizare, nu spre etape manuale izolate
Fluxul de lucru pentru analiza dezvoltării de linii celulare la KBI Biopharma
Într-o aplicaţie de dezvoltare de linii celulare documentată, spectroscopia Raman a permis modelarea predictivă pentru monitorizarea concentraţiei celulare pe mai multe linii de celule ovariene de hamster chinezesc care exprimă diferite proteine recombinante, asigurând o diferenţiere simplă pe o gamă largă de concentraţii ale celulelor viabile, minimizând în acelaşi timp volumul eşantioanelor.
Dincolo de fezabilitate, implementarea a arătat cum tendinţele spectroscopiei Raman se pot integra în mod natural în fluxurile de lucru pentru dezvoltarea liniilor celulare – de la proiectarea experimentală până la construirea modelului – şi pot sprijini o cale pe termen lung către monitorizarea automatizată în amonte.
De ce Endress+Hauser?
Endress+Hauser susţine dezvoltarea de linii celulare de la proiectarea experimentală până la modelarea chemometrică şi instruire, oferind soluţii de spectroscopie Raman adaptate pentru analiza micro-volumelor şi procesele pregătite pentru automatizare.
Compania noastră nu pune accentul doar pe instrumentaţie, ci pe a ajuta cercetătorii în domeniul dezvoltării de linii celulare să avanseze mai repede cu încredere, conservând culturile celulare valoroase şi asigurând în acelaşi timp decizii de proces mai rapide şi mai bine informate.
Modul în care măsurătorile de linie adaugă valoare bioprocesării dincolo de dezvoltarea de linii celulare
Această carte albă prezintă modalităţi practice de aplicare a măsurătorilor în timp real de linie, de la dezvoltare până la operaţiunile din amonte şi la cele din aval. Aflaţi cum conectarea parametrilor critici de proces şi a atributelor critice de calitate într-o etapă mai timpurie a procesului susţine un transfer tehnologic mai fluid, decizii de control mai sigure şi îmbunătăţiri măsurabile în ceea ce priveşte randamentul şi calitatea produsului.
Din carte, veţi afla:
- Modul în care informaţiile în timp real despre parametrii critici de proces şi atributelor critice de calitate susţin decizii mai timpurii şi mai bine informate
- Unde adaugă valoare senzorii de linie şi cu atribute multiple în procesele din amonte şi din aval
- Modul în care spectroscopia Raman contribuie la monitorizarea compoziţiei, calităţii şi consistenţei
- Cum arată continuitatea măsurătorilor de la dezvoltarea în laborator până la producţie
